- 品名: TaKaRa 含有UNG酶的Taq? HS PCR 試劑盒
- 品牌: TaKaRa
- 型號: R013S
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
商品名稱:TaKaRa Taq HS PCR Kit, UNG plus
商品編號:SPU2021050466
上架時間:2022-01-04
■ 制品內(nèi)容 (Code No.: R013A : 50 μl反應(yīng)×200次量) |
TaKaRa Taq HS (5U/μl)50 μl10 × PCR Buffer for UNG plus*1 (10 ×)1 mldU plus dNTP Mixture*2 (12.5 ×)800 μlUNG (2 U/μl)100 μl *1 Mg2+濃度:22.5 mM (10×)因dUTP的濃度設(shè)定是dTTP的3倍,所以總體dNTP的濃度變高,雖然PCR Buffer中含有MgCl2,但為了保持MgCl2與dNTP量的平衡,本制品中的Mg2+濃度高于TaKaRa Taq Hot Start Version (Code No. R007A)附帶的10× PCR Buffer (Mg2+ plus)。*2 dU plus dNTP Mixture:dUTP 7.5 mM、dATP 2.5 mM、dGTP 2.5 mM、dCTP 2.5 mM |
■ 制品說明 |
PCR是一種非常敏感的DNA擴(kuò)增技術(shù),易受污染影響,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染會產(chǎn)生假陽性結(jié)果。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染是End-point PCR方法,特別在食品、環(huán)境檢測中是令人頭痛的問題。 本制品是一種可防止假陽性產(chǎn)生的試劑盒。使用本制品是在PCR反應(yīng)時以dUTP取代dTTP,并同時使用Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Taq HS進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。反應(yīng)液配制后,對含有dU的DNA具有降解作用的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)可選擇性水解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,而對不含尿嘧啶的模板無任何影響。 UNG的作用原理:在PCR反應(yīng)前25℃、10分鐘反應(yīng)中,UNG酶可水解PCR反應(yīng)液中含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的N-糖苷鍵,產(chǎn)生脫嘧啶位點(diǎn)。隨后進(jìn)行95℃、2分鐘熱處理,在UNG酶失活的同時進(jìn)一步對磷酸骨架水解,從而消除含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的污染。 UNG酶可以作用于單鏈或雙鏈DNA,對RNA無活性。 |
■ 保存-20℃。 ■ 注意事項(xiàng)從反應(yīng)液的配制到PCR產(chǎn)物的檢出應(yīng)分別在4個操作區(qū)操作,操作區(qū)推薦進(jìn)行物理性隔離。操作區(qū)1:反應(yīng)液的配制及分裝。操作區(qū)2:樣品的制備。操作區(qū)3:將樣品添加到反應(yīng)液中。操作區(qū)4:PCR反應(yīng)及凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢出。為防止污染,除在操作區(qū)4外,請避免對裝有PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的tube進(jìn)行開閉。 |
TaKaRaTaq?HSPCRKit,UNGplus | |||
品牌 | CodeNo. | 產(chǎn)品名稱 | 包裝量 |
Takara | R013S | TaKaRaTaq?HSPCRKit,UNGplus | 50次 |
Takara | R013A | TaKaRaTaq?HSPCRKit,UNGplus | 200次 |
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