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■ 制品內(nèi)容 (25 μl反應(yīng)×50次量) |
1. 2X CycleavePCR Reaction Mixture625 μl2. dltS Primer/Probe Mix (FAM、ROX) *1100 μl3. dH2O500 μl4. dltS Positive Control*260 μl(30次量) *1 含熒光標(biāo)記探針,應(yīng)避光保存。*2 開封后,為了避免Positive Control的污染,將組份(1~3)和組份(4)分開保存。-20℃保存。 Limited Use Label License: [L4],[M40],[M46] |
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■ 制品說明 |
B族溶血性鏈球菌(Streptococcus agalactiae ;GBS)屬于革蘭氏陽性菌,是人泌尿生殖道和腸道的常在菌,新生兒敗血癥及出生后3個月時的腦膜炎、高齡者的侵襲性感染主要是由B族溶血性鏈球菌感染所引起的。通過培養(yǎng)檢測GBS時,存在檢測時間長、檢測靈敏度低等問題。 本制品是以GBS來源的編碼組氨酸激酶的dltS基因?yàn)槟康幕?,使用Real Time PCR儀,可快速對所有GBS進(jìn)行特異性檢測的試劑盒。 本制品使用了Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq? HS,可以有效地抑制在配制反應(yīng)液時發(fā)生的引物錯配及引物二聚體引起的非特異性PCR擴(kuò)增。本制品采用Cycling Probe法進(jìn)行檢測,Cycling Probe法是由RNA和DNA構(gòu)成的雜合探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢出法,能夠高效率地檢出擴(kuò)增過程中及擴(kuò)增結(jié)束時的目的基因片段。Cycling Probe內(nèi)部含有RNA堿基,一端標(biāo)記熒光物質(zhì),另一端標(biāo)記熒光淬滅物質(zhì),當(dāng)探針處于完整狀態(tài)時,由于熒光淬滅作用抑制熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,但當(dāng)探針與擴(kuò)增產(chǎn)物中的互補(bǔ)序列雜交后,RNase H在RNA部分將探針切斷,淬滅抑制作用解除,熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。通過測定熒光強(qiáng)度,能夠?qū)崟r監(jiān)控擴(kuò)增產(chǎn)物量。 制品中檢測GBS來源的dltS基因用探針的熒光物質(zhì)使用了FAM標(biāo)記,內(nèi)參照(Internal Control)檢測用探針的熒光物質(zhì)使用了ROX標(biāo)記。在同一反應(yīng)管內(nèi)可以對GBS的特異性dltS基因及內(nèi)參照同時進(jìn)行擴(kuò)增,通過兩種不同熒光標(biāo)記的探針可以對dltS基因及內(nèi)參照同時檢出。其中,對內(nèi)參照反應(yīng)的檢測,可以監(jiān)控反應(yīng)是否正常進(jìn)行,防止假陰性結(jié)果。本檢測無需電泳,簡單快速。 本制品是與Dr.Kimiko Ubukata,Department of Infectious Diseases,Keio University School of Medicine 聯(lián)合研發(fā)的。 |
■ 保 存 |
-20℃。
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