- 品名： TaKaRa 感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒
- 品牌： TaKaRa
- 型號(hào)： 9139
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
| ■ 制品內(nèi)容 (200 次量) |
| Solution A20 mlSolution B20 ml |
| ■ 制品說(shuō)明 |
| 大腸桿菌經(jīng)過處理后可以攝取外源DNA (Plasmid DNA、Phage DNA等)，處于這種狀態(tài)的細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞 (Competent Cell)。在基因工程實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)常要使用各種感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行DNA的轉(zhuǎn)化操作。實(shí)驗(yàn)使用的感受態(tài)細(xì)胞的來(lái)源大體可以分為兩種：一種是購(gòu)買商品化的感受態(tài)細(xì)胞，但商品化感受態(tài)細(xì)胞成本高、運(yùn)輸及保存有一定困難 (超低溫)；另一種是自己制備感受態(tài)細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)人員自己制作感受態(tài)細(xì)胞時(shí)，往往受到各種試劑及實(shí)驗(yàn)條件等限制，制備的感受態(tài)細(xì)胞效率低，達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求。Competent Cell Preparation Kit是一種方便、高效、快速制備感受態(tài)細(xì)胞的試劑盒。使用本試劑盒制備的感受態(tài)細(xì)胞可以滿足大多數(shù)實(shí)驗(yàn)的需要，并且適用于大多數(shù)常用的大腸桿菌，例如：E.coli DH5α、JM109、CJ236、HB101、MV1184、BMH71-18mutS等，轉(zhuǎn)化效率均可以達(dá)到1×106 cfu/μg pUC19以上 (轉(zhuǎn)化效率根據(jù)大腸桿菌細(xì)胞系及轉(zhuǎn)化用DNA不同稍有差異)。使用本試劑盒制備的感受態(tài)細(xì)胞可以在-80℃保存一年。 ■ 保存4℃。 |
| ■ 注意事項(xiàng) |
| 1. 制作感受態(tài)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用專用的玻璃器皿或塑料容器。洗刷這些玻璃器皿或塑料容器時(shí)應(yīng)盡量洗凈。由于微量的洗滌劑或污染物都可能降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率，因此在洗刷完用于制作感受態(tài)細(xì)胞的專用玻璃器皿或塑料容器后，建議用去離子水浸泡一晚，然后再充分洗凈。 2. 制作感受態(tài)細(xì)胞時(shí)使用的菌種，不應(yīng)使用4℃或常溫保存的傳代細(xì)菌。應(yīng)使用-70℃保存的菌種，在LB/抗生素平板培養(yǎng)基上分級(jí)劃線培養(yǎng)后，挑取單菌落。使用這種菌種制作的感受態(tài)細(xì)胞，能提高轉(zhuǎn)化效率。 3. 培養(yǎng)感受態(tài)細(xì)胞制備用菌體時(shí)，OD600值的測(cè)定應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行，以使OD600值控制在0.35～0.5之間。如果OD600值超出此范圍，可能降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。 4. 用于感受態(tài)細(xì)胞制備的菌體培養(yǎng)停止后要立即處理，不要將培養(yǎng)液過長(zhǎng)時(shí)間室溫放置，在冰中放置時(shí)也不要時(shí)間過長(zhǎng)。 5. 感受態(tài)細(xì)胞的制備操作過程中，離心后棄上清時(shí)要盡量棄盡，否則會(huì)降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。 6. 使用Solution A、Solution B懸浮沉淀時(shí)要用手指輕輕彈動(dòng)Microtube管壁，禁止劇烈振蕩操作。 7. 為了有效確認(rèn)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率，建議制作一批高純度的質(zhì)粒DNA分裝低溫 (-20℃) 保存，用作陽(yáng)性對(duì)照，以確認(rèn)每批制作的感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。 |
| CompetentCellPreparationKit | |||
| 品牌 | CodeNo. | 產(chǎn)品名稱 | 包裝量 |
| Takara | 9139 | CompetentCellPreparationKit | 200次 |
暫無(wú)內(nèi)容...
